液相色谱法概述
液相色谱法自20世纪60年代问世以来,由于使用了高压输液泵、全多孔微粒填充柱和高灵敏度检测器,实现了对样品的高速、和高灵敏度的分离测定。液相色谱由于吸取了经典液相色谱的研制经验,并引入微处理机技术,极大的提高了仪器的自动化水平和分析精度。现在用微处理机控制的液相色谱仪,其自动化程度很高,既能控制仪器的操作参数(如溶剂梯度洗脱、流动相流量、柱温、自动进样、洗脱液收集、检测器功能等),又能对获得的色谱图进行收缩、放大、叠加,以及对保留数据和峰高、峰面积进行处理等,为色谱分析工作者提供了、功能齐全的分析工具。
液相色谱仪常见故障解决方案
如何排除液相色谱仪气泡溢出的故障?
流动相内产生都无法清除不断产生的气泡,主要是因为过滤器长期沉浸于铵等缓冲液内,昭和配体交换色谱柱报价,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。处理过滤器浸泡于5%溶液中,昭和配体交换色谱柱报价,超声清洗几分钟即可;亦可将过滤器浸泡于5%溶液中12~36小时,轻轻震荡几次,再将过滤器用纯水清洗几次,打开泄压阀,打开purge键清洗脱气,如仍有气泡不断从过滤器冒出,继续将过滤器浸泡于5%溶液中,如没有气泡不断从过滤器中冒出,配体交换色谱柱报价,说明过滤器内部的霉菌菌团已被破坏,流动相可以流畅地通过过滤器。打开泄压阀,昭和配体交换色谱柱报价,打开泵,流速调至1.0~3.0ml/min,纯水冲洗过滤器1小时左右。即可将过滤器清洗干净。关闭泄压阀,纯冲洗半小时即可。
液相色谱的基本原理
液相色谱基本原理是分离度(也叫分辨率)正比于
四分之理论塔板数n的平方根乘以
选择因子a比上a-1再乘以
分离因子k 1比上k
我认为分离度和这些变量是正比关系而不是准确的等于,如果非要说是等于的关系,再加上一个常数可能会更合理。
n和柱长(正比)、粒径(反比)、固定项填料(全多孔硅胶型,表面多孔/核壳型)有关
a和流动相种类(反向色谱:和)、pH(2到9)、柱温有关
分离因子/保留因子(平衡状态下,固定相中含量与流动相中的比值)和流动相种类、流动相比例、柱温、固定相填料有关
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